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18新利最新登入光学显微镜的工作原理

类型的显微镜

相差显微镜的光路

在显微镜下观察标本的一个严重问题是,他们没有太多的对比图片。特别是生物(如细胞),虽然天然色素,如绿色的叶子,可以提供良好的对比。以提高对比度的方法之一是将试样用彩色颜料或染料,绑定到特定结构内的标本。不同类型的显微镜开发提高样本的对比。专门化主要照明系统中,光通过样品的类型。例如,暗视野显微镜使用一个特殊的电容器来阻挡大部分的阳光照亮了标本和斜的光线,就像月亮的光太阳在一个日食。这光设置提供了一个完全黑暗的背景和增强图像的对比,细节,明亮的区域边界内的标本。

这里有各种类型的光学显微镜技术:

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  • Brightfield——这是基本的显微镜配置(图片见过到目前为止都来自brightfield显微镜)。这种技术已经很少对比;的照片你见过到目前为止,大部分的对比提供了通过染色标本。
  • 暗视野——这个配置增强对比度,如上所述。看到分子表达:暗视野显微镜对细节和例子。
  • Rheinberg照明——此设置类似于暗视野,但使用一系列的过滤器来产生“光染色”的标本。看到分子表达:Rheinberg照明细节和例子。

以下技术Rheinberg照明使用相同的基本原理,通过使用不同的光学组件实现不同的结果。的基本思想是把光束分成两条途径,照亮了标本。光波通过致密结构内的标本相比慢下来,通过密度较低的结构。所有的光波进行收集和传播目镜,重组,所以他们影响彼此。干预模式提供了对比:他们可能显示黑暗区域(更稠密)光背景(密度较低),或者创建一个类型的假三维(3 d)的形18新利最新登入象。

  • 相衬——该技术最适合看活的标本,如培养细胞。
在相差显微镜下,环状的物镜和冷凝器分离光。的光通过光路的中心部分是重组的光环绕着外围的标本。这两条路径产生的干扰产生图像的密度比背景结构显得更黑。看到分子表达:相差显微镜对细节和例子。
相衬显微镜的图像从老鼠大脑的神经胶质细胞培养
礼貌特里萨·m·Freudenrich照片
  • 微分干涉对比(DIC)——DIC使用偏振过滤器和棱镜来分离和重组光路径,让3 d外观标本(DIC也被称为Nomarski后的人发明了)。看到分子表达:微分干涉对比显微镜的细节和例子。
  • 霍夫曼调制对比度-霍夫曼调制对比度DIC类似,除了它使用盘子小缝在轴和离轴光路产生两组的光波通过标本。再一次,形成三维图像。看到分子表达:霍夫曼调制对比度显微镜对细节和例子。
  • 极化偏振光显微镜使用两个偏振器,一个标本的两侧,定位互相垂直,因此只有光通过样品到达目镜。光偏振在一架飞机穿过第一个过滤器,达到标本。均匀间隔的,图案或结晶部分标本的光经过旋转。其中一些旋转光穿过第二偏振滤光镜,所以这些定期间隔区域出现明亮的黑色背景。18新利最新登入看到分子表达式:介绍偏振光显微镜细节和例子。
  • 荧光——这种类型的显微镜使用高能短波长光(通常是紫外线)激活电子在某些分子在一个标本,导致这些电子转向更高的轨道。当他们回到原来的能级,它们发出的低,——光(通常是在可见光谱),形成图像。

在下一节中,我们将讨论荧光显微镜进行更详细的。

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