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18新利最新登入光学显微镜的工作原理

荧光显微镜

数字化显微镜的光路

荧光显微镜使用汞或氙灯产生紫外线。光显微镜和打击二向色镜一面镜子,反映出一个波长范围和允许通过另一个范围。二向色镜反映了紫外线的标本。紫外线激发荧光分子内的标本。物镜收集fluorescent-wavelength光。这个荧光通过二向色镜和一个吸收滤光片(消除波长以外的荧光),使目镜形成图像。

样品中的荧光分子可以自然发生或。例如,您可以用染料染色的细胞钙黄绿素/ AM。就其本身而言,这种染料荧光。的是部分分子隐藏部分结合钙的钙黄绿素分子,这是荧光。当你混合解决方案洗澡的钙黄绿素/ AM细胞,染料跨越进入细胞。活细胞有删除是部分,陷阱细胞内的钙黄绿素和允许钙黄绿素结合钙,这样它会发出荧光绿色在紫外线照射下。死细胞不再有这种酶。因此,活细胞将发出荧光绿、死细胞不会发出荧光。你可以看到死去的细胞在相同的样品如果你在另一个名为propidium碘的染料混合,只有穿透死细胞。Propidium碘结合DNA核和红在紫外线照射下。这个double-dye技术用于毒理学研究来确定细胞的百分比人口死亡处理一些环境化学、农药等。

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培养老鼠大脑细胞的荧光图像。活细胞染色剂与钙黄绿素(左)和死细胞染色与propidium碘(右)。
礼貌特里萨·m·Freudenrich照片
培养老鼠大脑细胞的荧光图像。活细胞染色剂与钙黄绿素(左)和死细胞染色与propidium碘(右)。
礼貌特里萨·m·Freudenrich照片

荧光显微法技术用于看到结构和测量在活细胞生理生化活动。各种荧光指标可用于研究许多生理上重要的化学物质如DNA,钙、镁、钠、pH值和酶。此外,抗体特定于各种生物分子化学绑定到荧光分子和用于染色细胞内的特定结构。看到分子表达:荧光显微镜对细节和更多的例子。

在下一节中,我们将研究光学显微镜的组成部分及其功能。

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